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暗星

银虫 (小有名气)

[交流] 3'race

我最近在做3’race,但是却一直没有结果。我的做法如下:
RNA反转录没有问题,因为内标和我基因的特异引物都能够扩出来,但是用我基因的正向引物和3‘race的反向引物组配时扩增出来的带特别的弱,对于回收来说是太难了!但是基因引物扩增的带却很亮!
在论坛上也看到了类似的帖子,但是没有找到很好的答案,希望高手能帮在下分析分析!谢谢
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司马诸葛

木虫 (正式写手)

帮顶一下,呵呵
2楼2009-08-23 17:18:46
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anik

银虫 (正式写手)

重新设计引物,估计你设计错了
3楼2009-08-23 22:56:42
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boouy

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物最重要,特别是退火温度要高一点.
4楼2009-08-24 08:41:43
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love_st

金虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物TM值做个梯度,优化下体系,还是很有希望的
5楼2009-08-24 08:47:13
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

巢氏引物


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
第一轮弱很正常,设计巢氏引物做第二轮PCR,应当可以得到不错的结果
6楼2009-08-24 10:02:13
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十比

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
同意楼上的,一般要两对引物的,第二轮扩后应该没问题的。
7楼2009-08-24 11:19:47
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