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液相(HPLC)保留时间不重现的8个可能原因 已有4人参与
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1确认流动相是否新鲜配制的,比例有无错误。 2确认色谱条件是否在色谱柱使用范围内,如pH范围、温度和压力。 3仔细观察柱前压的变化。如果压力稳定,可以判断泵系统没有问题。如果压力不稳定,通常是由于泵内有气泡造成的,一定会影响保留时间。将流动相仔细脱气,并排出泵内气泡。 4观察色谱峰形和柱效变化情况,确认色谱柱是否被污染。如果色谱柱被污染,可使用适当溶剂冲洗。 5如果同时伴有色谱柱柱压升高,降低柱压。 6如果使用梯度洗脱,确认平衡时间是否足够长。流动相中使用离子对试剂(烷基磺酸钠等)或固定相为正相硅胶等往往需要更长的平衡时间。 7确认样品是否过载。 8组分在色谱柱中保留不够。调整色谱条件,使样品在柱上适当保留。 END 关注公众号“ 质谱学堂 ”;在公众号对话框输入“中国药典”即可领取 2020版《中国药典》1~4部;分享公众号任意文章至微信朋友圈,即可获取“色谱系列丛书”共12本。 “ 质谱学堂 ”专注于质谱使用技术、生物样品分析、DMPK领域的知识内容分享 |
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