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心台明镜

木虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 中药质量评价

[交流] [求助]细胞爬片盖玻片处理方法

想请教下各位虫友：

做细胞爬片的盖玻片提前应做哪些处理？
个人查了一下基本包括：自来水冲洗-泡酸过夜-纯水洗涤-酒精浸泡过夜-晾干

1.这个步骤是否可行呢
2.请问其中泡酸处理的酸是什么酸
3.有些资料又显示需加多聚赖氨酸增强粘附性，这是否有必要，如果有，添在哪一步比较适合
4.最后一步晾干大多采取烘干法，但是这样烘干的盖玻片不可避免会有水印，表面就模糊了，而晾干在类似搪瓷盘的容器上又会因粘壁而污染，请问哪位有更好的办法呢？

谢谢大家~~

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1楼2009-08-23 13:31:47

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

wangyh2028

铁虫 (小有名气)

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虫号: 583133
注册: 2008-07-25
性别: MM
专业: 经济林学

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):呃。。楼上的MM，我想知道的是盖玻片的处理方法，不是细胞爬片的制备。。。 8-23 14:42

（一）细胞爬片的制备
（1）如果使用载玻片或盖玻片，必须在使用之前灭菌。可以一次灭菌并贮存在无菌状态下。如果使用少量的盖玻片，用金属镊子夹住盖玻片，在70%乙醇中浸泡，然后在火焰上烤干。要轻轻地镊取，以防破裂。为了方便起见，可以将盖玻片浸泡于70%的乙醇中，使用时放在火焰上处理。如果使用的盖玻片或载玻片数量较多，可以将它们放于专用的金属支架上，然后高压消毒。如果需要的数量更大，则可将其放在耐热的容器中，干烤2小时；
（2）在无菌状态下，把干燥的玻片放于适当的培养皿中。盖玻片可以用金属镊子镊取，圆形盖玻片可以放在24孔培养板的孔中，直径90mm的培养皿能够放入10-15张盖玻片，或者放入一张标准的载玻片；
（3）将悬浮的细胞放入组织培养皿中，培养至少24小时，让细胞贴附在玻片上。要想得到一个较好的结果，在加细胞时，密度应低，以防细胞密度过高。
（4）如果细胞数目有限，可把细胞悬液直接滴在玻片上，静置4小时后再轻轻加入培养液。通过这种方式，大部分细胞将粘附于玻片上，然后再培养约24小时，使细胞适当扩增。此时，取出载玻片或盖玻片可进行固定。
http://q.sohu.com/forum/20/topic/1833339