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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于感受态细胞制备
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菊花茶

木虫 (著名写手)

[交流] 关于感受态细胞制备

在制备感受态细胞时，(mgcl2+cacl2)溶液用前需不需要灭菌？
还要摇菌在OD600的值大约多少时最好？

[ Last edited by 菊花茶 on 2009-8-23 at 13:25 ]
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1楼 2009-08-23 13:05:06
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qzhaiyan

木虫 (著名写手)

小胖子
★ ★
菊花茶(金币+2,VIP+0): 8-23 13:29
我们一般都灭菌的 灭完后分装！
0.3-0.4最佳
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2楼2009-08-23 13:13:40
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
★
菊花茶(金币+1,VIP+0):mgcl2高温下会降解吗？ 8-23 13:30
灭菌时当然的！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
3楼2009-08-23 13:17:56
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+2,VIP+0):奖励一下 8-23 16:09
amisking(金币+3,VIP+0): 8-23 16:33
我一般都是过滤除菌的，呵呵，这样可能更好，可以去掉一些杂质。

OD0.4左右或者OD0.8左右都行的，DH5alpha 大部分株系这两个浓度做出来都行。有

的株系用后者较好。

我比较懒，一般都作一步法的，TSS法，常用株系的转化效率比CaCl2 做出来的高。

主要是简单，摇菌，沉淀，重悬即可，普普通通都可以到10的8次的。足以满足普通

的转化实验。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2009-08-23 13:52:34
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smallcat227

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要灭菌的，常温高压也可以，最好过滤除菌，楼上的极有道理
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5楼2009-08-23 16:03:24
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anik

银虫 (正式写手)
灭。。。用的东西及试剂能灭的都要灭。。。
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6楼2009-08-23 22:59:32
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caoliang38

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照分子克隆书上的 要灭菌 毕竟你是做感受态 有可能有其他污染 至于OD值 是在0.35收集最好
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7楼2009-08-24 19:58:44
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们是高压灭菌的，OD0.4左右，做出来效果挺好的。
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8楼2009-08-24 20:53:01
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