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【动物实验】大鼠胃的药物吸收测定
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目的和原理 尽管胃不是药物的主要吸收场所,还是有某些由胃粘膜吸收的报道,用大鼠胃痿技术直接测定胃的药物吸收。 操作步骤 雄性 wistar大鼠.体重220~300g.50mg/kq戊巴比妥1.p.麻醉.颈静脉插管.用以给予肝素化盐水(30001U/kg) 和实验过程中替换全血。实验前立即从肝素化供血大鼠采集替换血，在颈动脉作另一插管,用以收集循环血液样品。上腹部正中切口.注意结扎止血.用丝线结扎右侧胃网膜动静脉分支然后用丝线结扎胃和左肝小叶后韧带.分离尾肝小叶 剪断结扎冒脾系膜用纱布将肝小叶拖出手术野 用合话号码缝线结扎胃血管和食管,然后结扎责门和贲门血管,前胃切口以使胃内容物移出。 温生理盐水清洗胃痿 汲干液体。将一改良的带卡口的三通接头插人上述切口并结扎,用注射器经三通给药。将胃痿推至右位.暴露左胃静脉.在其与牌静脉交界处插管用21-gauge针头与一条15cm长的聚乙烯管相连(内径.0.75mm.外径.1.45mm)。用带有泡沫橡胶的夹子夹住,以防操作时脱落。将药物注入胃内.并在一定时间间隔内由胃痿取血.测定血容积称重并用血球容积器(HCT)指读,并依公式转换成单位。 总血重量(g) 容积(ml)= HCTX 血细胞密度 +(1- HCT)x 血浆密度 血细胞和血浆密度测定值由4只大鼠的五次测定获得，血样本于3000g离心10min:取自胃痿的血样品放置冰上直至而浆可在3000g离心10min分离.血浆在分析冷冻前保存。以0.7 ml/min的速率置换血液.血液来自于用蠕动泵温和振荡的贮液器0.5m待试化合物注入胃痿。用特异检测方法测定该化合物的血浆水平。在30~60min期问.每4min收集一次血浆样品试验结束后收集胃瘘内液体测定胃内药物残留量。 结果评价 计算4-6个实验的血浆浓度的均值土SD.并图示不同时间吸收状况 |
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