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缔一0601

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞支原体问题求助已有2人参与

不用实验室方法,通过简单的观察,到底可不可以判断细胞是否有支原体污染?
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不能,支原体在常规光学显微镜下看不见
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-10-20 13:41:20
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细胞房铁虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缔一0601: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢 2021-10-21 14:44:51
自行判断的话,主要是这么几个:
1、细胞生长缓慢甚至死亡:支原体的生长环境与细胞高度重合,一些支原体(包括最为常见的人型支原体、发酵支原体、精氨酸支原体等),通过精氨酸脱亚胺酶分解精氨酸来供能。当这些支原体混入细胞培养体系后,会与细胞争抢精氨酸,导致细胞「吃不饱饭」,出现营养不良的症状:生长速率异常、活力下降、易脱壁等等。而精氨酸又是细胞组蛋白的重要组成成分,缺乏精氨酸会严重影响组蛋白合成,引起染色体断裂。再加上细胞处于长期饥饿的状态,最终导致细胞生长变慢甚至死亡。

2、细胞变形、碎片增加、易聚团、有小黑点:支原体通过黏附作用与细胞结合,获取细胞膜表面的脂质和胆固醇,破坏细胞膜的完整性,同时影响细胞间的信号传递。支原体会趁机侵入细胞,增加细胞中核酸内切酶的含量,导致细胞染色体异常进而死亡。经过支原体的这一番操作,细胞结构已经被严重破坏,随之而来的就是细胞形态改变、细胞易聚团、大面积细胞凋亡制造的蛋白碎片(也就是培养基中的碎片和小黑点)

3、培养基易变黄:我们都知道,正常情况下,培养基中养分会逐渐耗尽,细胞代谢废物会逐渐累积,上清液会变成黄色,因此要定期更换培养基。支原体也是如此——当培养体系中感染了支原体并大量繁殖的时候,会向外排放代谢产物,影响体系中的PH,加快培养基变黄的速度。

综上所述,如果你培养的细胞出现上面这些情况,可以考虑一下是否出现支原体污染,通过支原体检测试剂检测一下,最终确定,赛多利斯、minerva biolabs这些都可以。

发自小木虫IOS客户端
3楼2021-10-21 14:36:42
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