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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求帮忙分析pcr体系污染原因
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小豆芽_won

银虫 (小有名气)

[求助] 求帮忙分析pcr体系污染原因

实验目的：两步PCR扩增环境DNA中的原生动物18s V4区序列
实验思路：先用原生动物通用引物富集环境DNA模板中的原生动物DNA模板量；再以第1轮PCR产物为模板，利用真核生物V4区通用引物扩增原生动物V4区序列；两轮PCR的体系如图；打算利用胶回收纯化第二轮PCR产物后进行二代测序。
实验问题：1轮PCR结果条带有污染，2轮PCR条带更是有大面积污染，求分析图片中污染可能是什么原因造成的

求帮忙分析pcr体系污染原因


求帮忙分析pcr体系污染原因-1


求帮忙分析pcr体系污染原因-2


@biostar2009 @wizardfan @youlinglyw @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2021-10-19 17:26:44
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小豆芽_won

银虫 (小有名气)
图三第一个带是1轮pcr的负对照作为模板的结果，第二个带是第二轮pcr的空白对照

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2楼2021-10-19 17:28:37
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小豆芽_won

银虫 (小有名气)
求解

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3楼2021-10-24 20:51:08
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