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sanbai-li

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光标记适配体荧光强度不稳定

求助求助~
FAM- CTC GGT TGT GGT GTT AGT TGG TAC TGC GCC TCc GTC GTC CTG TCA cTc TGC TGC AGC GCG CGA GCC ATA CAC TAT ACACCT TAA AAT ATA GTT GCC TAGG
荧光标记适配体如上所述。

实验条件:
1.溶剂: PH=8.0的TE缓 冲液,150mM NaCI 2mM MgCl
2.温度:室温
3.将100uM的aptamer稀释至500nM,体积为2ml, 使用常量比色皿(2ml) 进行荧光表征

问题:

荧光信号不稳定,同一浓度样品之间强度波动很大(~10%) 。使用200μl进行微量测量时波动更大(~50%)

不太能理解为什么会有这么大的数值波动,对实验的结果影响很大,不知道是不是我哪边的操作有问题,第一次接触关于生物领域的实验

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