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[交流] 关于循环内皮细胞分离问题

循环内皮细胞的检测：
1.Percoll密度梯度离心法：本法是应用密度梯度分层离心的原理，将适当浓度的密度梯度分层液加入抗凝血中，利用血液中各种细胞的不同比重进行离心分层。
该方法因为循环内皮细胞和血小板的漂浮密度相近，所以分离后大多为血小板。

2.Percoll密度梯度离心法的基础上进行流式细胞仪检测：经上法分离后再用FITC标记的CD31小鼠抗人单克隆抗体作为内皮细胞的标志物，进行流式细胞仪计数。
参考：[李宏伟，迟喧，修瑞娟．一种全新的检测循环内皮细胞的方法一流式细胞仪法[J]．中国微循环，1999，11：239．]

但据我所知：CD31（血小板内皮细胞黏附分子）血小板、单拉细胞、中性粒细胞、T细胞亚群(尤其是幼稚的CD8 T细胞)及NK细胞表面。
参考：[杨晓芳，PECAM一1／CD31的研究进展[J]国外医学免疫学分册1998.21.1 :38-41.]

问题：
1、percoll分离循环内皮细胞后，如何区分循环内皮细胞，血小板，一些细胞碎片？如能提供图参考，不胜感激！
2、既然血小板有CD31分布，那么后方法2怎能比方法1更精确计数循环内皮细胞？

另外我也看到近年来使用：免疫磁珠，以及多标记的流式细胞仪检测循环内皮细胞！但经费有限.不在计划之内！
找了一些通讯作者的邮箱，但发过去后都石沉大海

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-4 at 10:13 ]

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1楼 2009-08-21 08:45:49

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