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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 大肠杆菌异源表达蛋白
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473212012

新虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌异源表达蛋白 已有1人参与

大肠诱导表达前，接1：1000接种量接种种子液后，发现菌长得很慢，3h，od600在0.3左右，要摇5h，od600才能到0.6。加iptg诱导12h后，发酵液离心，取菌体跑sds，发现条带很干净，与空载对比，很多杂蛋白都消失了，只有空空的几条粗条带。有没有碰到类似问题的哥哥姐姐们，求助！困扰我好几个月了，呜呜呜。

@wizardfan @youlinglyw 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2021-09-22 11:16:55
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xjqxzlxr

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把跑的图贴上来看看，每个泳道的样品也说一下
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2楼2021-09-22 14:24:48
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张小蛋

新虫 (小有名气)
是不是染噬菌体啦，或者重新转化一下，一般1:100接菌

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3楼2021-09-22 18:51:09
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quight

金虫 (正式写手)
我也遇到类似的问题，你表达的是什么蛋白，对大肠有没有毒性

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JUSTBEYOURSELF
4楼2021-09-24 10:17:50
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473212012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xjqxzlxr at 2021-09-22 14:24:48
把跑的图贴上来看看，每个泳道的样品也说一下

为啥发不了图，就是选中了发不了。

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5楼2021-09-25 08:44:59
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473212012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by quight at 2021-09-24 10:17:50
我也遇到类似的问题，你表达的是什么蛋白，对大肠有没有毒性

我表达的是一种抗菌蛋白（丝氨酸蛋白酶），主要是抗果蔬上的霉菌。连接的是pet28a载体。

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6楼2021-09-25 08:46:54
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yugege2009

至尊木虫 (知名作家)
都是做发酵的，可否加个微信？

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7楼2022-05-23 16:39:01
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后来就算

金虫 (小有名气)
1:100接种，诱导前测一下残糖
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什么时候积分不是零啊
8楼2022-09-29 22:05:17
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