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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 基因敲除失败
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学员m3gD9M

新虫 (著名写手)

[求助] 基因敲除失败 已有1人参与

用了三亲结合和电转做基因敲除，最终屡次都没有敲除成功，用的pK18质粒，双抗板上单交换都没有得到，继续往后做，蔗糖板上也都是野生型，电转也是，一直都是野生型，不知道到底是哪里出了问题，请大神指点一二。

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2021-09-15 21:17:50
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forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
敲除哪种菌株？我或许可以指点一下

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2楼2021-09-15 23:06:02
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普通回帖

小郑555

新虫 (初入文坛)
你是敲除分支杆菌吧

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3楼2021-09-16 00:04:15
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学员m3gD9M

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2021-09-15 23:06:02
敲除哪种菌株？我或许可以指点一下

金黄杆菌

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4楼2021-09-16 12:42:48
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学员m3gD9M

新虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小郑555 at 2021-09-16 00:04:15
你是敲除分支杆菌吧

金黄杆菌

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5楼2021-09-16 12:43:02
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forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
阳性菌啊，不好敲，是不是对蔗糖不敏感

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6楼2021-09-16 18:16:05
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学员m3gD9M

新虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by forhighbio at 2021-09-16 18:16:05
阳性菌啊，不好敲，是不是对蔗糖不敏感

阴性菌

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7楼2021-09-16 22:03:14
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forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)
那肯定能否敲除成功

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8楼2021-09-17 14:56:20
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学员m3gD9M

新虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by forhighbio at 2021-09-17 14:56:20
那肯定能否敲除成功

可以给点建议吗，单交换都没有拿到，菌株抗性太强了

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9楼2021-09-18 14:45:09
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狗狗狗尾巴草

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有没有其他抗性的质粒，我觉着可以换一个质粒试试
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10楼2021-11-16 20:38:32
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