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糖原染色法
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PAS染色全称为过碘酸雪夫氏染色（schiff periodic acid shiff, PAS），又称糖原染色。一般用来显示糖原和其它多糖物质。 染色原理： 细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基，其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色，沉积在细胞内多糖所在之处。 染色步骤 1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水，蒸馏水洗2min（细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）； 2.滴加过碘酸溶液，氧化5min； 3.蒸馏水洗10min； 4.滴加Schiff试剂，侵染10-20min； 5.倾去Schiff 试剂，流水冲洗10min； 6.滴加苏木素染色液，染核1-2min； 7.流水冲洗5min； 8.酸性乙醇分化液分化； 9.Scott反蓝水洗3min； 10.常规透明、封片。 糖原、多糖类物质及其他PAS反应阳性物质呈紫红色，细胞核呈蓝色。 注意事项： 1.碘酸溶液为透明溶液，配制后放4度冰箱备用，无法从常规的颜色辨别高碘酸的好坏，需要定期更换； 2.染色试剂均应低温保存，临用前半小时取出恢复室温； 3.Schiff染液染色时间可随温度调整，室温高可减少染色时间，冬季室温低，可延长至20 min左右。 |
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