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利用NBT光还原法测定拟南芥sod活性
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我是按照生化实验书本的做法。 课本描述“在氧化物质存在时，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化产生超氧自由基。加入NBT后，光照条件下，NBT与超氧自由基反应呈黄色（单甲月替），继而还原成蓝色（二甲月替），在560nm有最大吸收峰。加入SOD可以使超氧自由基与H+反应，从而抑制了NBT光还原的进行” 我按照实验要求加入试剂和酶提取液之后，在室温日光下放置10min，反应液依旧是黄色的，没有变蓝。我不确定是反应时间不足，或者是其他问题。 我的反应体系是放在10ml离心管，反应时盖上盖子。 |
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