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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 其它 » 蛋白质与小分子结合 热稳定性变化
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)

[求助] 蛋白质与小分子结合 热稳定性变化 已有2人参与

蛋白质与小分子存在相互作用，热稳定性如何变化？13年14年的science和nature protocol上的CETSA都是说结合会使蛋白质热稳定性增加，原理是ligand-induced stabilization of target protein，结合后释放自由能，热稳定性增加。在没有其他蛋白干扰的体系下，加入小分子如果使蛋白热稳定性降低又能说明什么，不能说明存在相互作用吗？

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坚持就是胜利！
1楼 2021-08-27 11:34:12
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zhongzhenlu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
CESTA的数据和NanoBRET的数据，一起来看，是不是更有说服力一些？？
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一树猫咪
2楼2021-08-27 18:05:17
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2012csc

至尊木虫 (知名作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhongzhenlu at 2021-08-27 18:05:17
CESTA的数据和NanoBRET的数据，一起来看，是不是更有说服力一些？？

检测相互作用的方法很多，实验室只有CETSA这个条件，别的方法老板也不会接受。就是想咨询一下没有其他蛋白等条件干扰，蛋白热稳定性减弱，能不能说明有相互作用。

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坚持就是胜利！
3楼2021-08-27 20:36:29
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xpolice7

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

让蛋白的 Tm 值升高，或者降低，其实都能说明 ligand 与蛋白产生了相互作用，这只是个理化性质上的变化。一般结合形成复合物后使蛋白的稳定性提高，Tm值上升，但是也有的配体与蛋白结合后，Tm明显降低，筛选配体的时候可以将两种都选出来，进一步测Kd 或者IC50 加以验证。
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知者不惑
4楼2021-08-31 16:02:04
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