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刚果红染色实验，鉴别淀粉样变及分型其他染色无法比拟 -北京白奥思科生物分享
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淀粉样物质是一种无固定形状的细胞外嗜酸性物质，可存在于不同的组织、器官，导致的疾病称为淀粉样变。 淀粉样蛋白沉积于组织或器官引起的慢性代谢性疾病，可侵犯全身多种器官，也可仅局限于皮肤。 淀粉样物质主要是由蛋白质构成，该蛋白大部分排列成反向的β-折叠层结构。在电子显微镜下淀粉样物质呈原纤维排列，病例材料中为大量细胞外的不分支的细丝，大多随机排列。此类蛋白质的化学反应类似淀粉，实际与淀粉无关。 通常无法用已知病因解释时可用活体组织检查为依据，用于识别淀粉样物质的组织学方法有甲紫染色、刚果红染色、偏振光显微镜观察等。 目前研究发现传统的甲紫染色法灵敏度低、特异性差，经典的而且有效的方法是刚果红染色，1922年Bennhold发现了刚果红可以用于活体内淀粉样物质的鉴别，并应用到组织切片。 01 试剂配制 甲醇刚果红染液: 刚果红 0.5 g 甲醇 80 ml 甘油 20 ml 碱性乙醇分化液: 氢氧化钾 0.2 g 80%乙醇 100 ml 02 染色步骤 （1）切片脱蜡至水（和常规染色处理方法一致） （2）甲醇刚果红染液染10～20分钟 （3）用碱性乙醇分化液分化数秒，水洗 （4）苏木素复染2分钟，水洗 （5）脱水，透明，封固 03 结果 淀粉样物呈桔红色。 04 类淀粉染色的应用 确定淀粉样变性及玻璃样变性的胶原组织，后者在刚果红法染色后呈淡桔色，常用于诊断甲状腺髓样癌和胰岛细胞瘤等。 05 注意事项 （1）切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 （2）刚果红染色液染色时尽量采用浸染，如果滴染，应置于湿盒防止溶液挥发。 （3）分化时间较短，胶原纤维也被染成红色；分化过度，淀粉样物质也被脱色。如果脱色过度，可以将切片清洗后重新用刚果红染色液浸染。 |
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