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wh7690703

木虫 (正式写手)

[交流] 小片段DNA(50-150bp)胶回收试剂盒

如题!本人需要回收50-150bp大小的DNA片段,不知各位大侠一般采用何种方法?
或者有什么好的试剂盒推荐给小弟用。
谢谢给位的关注与支持!
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再见苏摩

银虫 (初入文坛)

★ ★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-18 14:47
wh7690703(金币+1,VIP+0):请问低熔点胶怎么融化?酚氯仿抽提回收具体步骤如何? 8-18 14:50
个人喜欢用低熔点胶酚氯仿抽提回收
2楼2009-08-18 11:43:25
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j2

木虫 (正式写手)

一般的纯化试剂盒都不错啊
修炼ing,当虫仙……
3楼2009-08-18 13:07:00
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-18 14:47
wh7690703(金币+1,VIP+0):谢谢,请问效果如何? 8-18 14:50
4楼2009-08-18 14:34:06
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charlies929

至尊木虫 (正式写手)

★ ★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-18 14:48
wh7690703(金币+1,VIP+0):谢谢参与 8-18 14:51
Axygen的不错,我用过回收96bp的片段;貌似生工BBI的也可以我们实验室有人用过
5楼2009-08-18 14:34:08
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


wh7690703(金币+1,VIP+0):但是,太贵了。兄弟,可有其他方法? 8-18 15:17
QIAGEN的核酸纯化是行业标准来着~~
6楼2009-08-18 14:59:58
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


wh7690703(金币+1,VIP+0):采用苯酚氯仿乙醇沉淀法提取,之前的胶块如何融化? 8-18 17:03
re楼主
许多胶回收试剂盒并不能很好地回收短片段
Promega很老实,列出了各种片段的回收效率
85bp的才55%的效率,而55bp的才26%
但一旦有100bp,就达到了84%
这或许是目前基于硅胶膜回收的缺陷吧
Invitrogen的也号称能够回收40bp以上的片段
但是具体效率并没有标明
如果你的片段比较单纯,且纯度要求不算太高,那么可以尝试醇沉淀然后继续做后续实验
7楼2009-08-18 16:46:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

继续re
因为QIAGEN的试剂盒配的溶胶液经常会剩下很多(我上个盒子用省1瓶溶胶液……)
因此可以加一点试剂盒的溶胶液来弄

我记得分子克隆还是经编分子生物学实验指南上面有溶胶液的配方,你可以去查查
8楼2009-08-18 18:14:12
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liluolove

我用的是生工的,还行~
9楼2009-08-20 11:05:45
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一道

木虫 (正式写手)

我们实验室用的是Qiagen的试剂盒
10楼2009-08-20 11:11:30
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