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学术菜鸡Nhao

新虫 (小有名气)

[交流] miRNA定量求助 已有3人参与

我最近一直在做昆虫细胞的miRNA定量,但是生物学重复之间差异很大，即很不稳定，且内参、WT组差异都很大，而技术重复之间还好，不知道问题出现在哪？细胞铺板是一起混匀铺的，以及在做定量时加样已经多次保证严格加样了，目前找不出原因？会不会是细胞系的原因？或是用trizol法提取RNA使miRNA得到的效率不一样？
各位大神救救我吧，毕不了业了

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1楼 2021-08-08 10:08:18
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Trizol可以提miRNA，但是后续洗涤往往会损失较多的miRNA，我以前做这块儿也是用的Trizol，但是后续用离心柱法才行，而且洗涤液的优化非常关键
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核酸提取与Taqman诊断
2楼2021-08-12 09:09:39
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残留躯壳

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你可以具体讲一下你的实验步骤吗？怎样去定量的，这样好给你分析
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卧薪藏胆，三千越甲可吞吴
3楼2021-09-26 23:11:12
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我一吃就胖

新虫 (初入文坛)
用试剂盒
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4楼2022-02-16 16:11:22
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