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新手弱问，免疫组化和western blot有什么区别
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鄙人是实验室新手，以前只做过免疫组化，觉得操作简单，且对蛋白定性很灵敏，利用图像分析软件可以和对照组比较，现在开始学western blot，觉得好复杂啊，而且也只能定性，不明白为什么说这是半定量的方法？请问各位高手，这两种技术具体各有什么区别和优势？能否指点一二，不胜感激。 [ Last edited by 350784478 on 2009-9-3 at 08:59 ] |
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seabird06
铁杆木虫 (著名写手)
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两者都可定量，但是各有优势！ 免疫组化的优势是可以原位显示目的蛋白的位置，而且可以用长期保存的石蜡切片来做，最近几年的TMA更是免疫组化的发展，可以同时显示几百个病例组与对照组的差别，非常直观！免疫组化主要是显示病例与对照的差别，但是用于定量不如WESTERN准确。 Western是蛋白定量和表达的强力工具，通过对目的蛋白量上的直接测定来检测目的基因的表达，相互样品之间表达量的比较通过ACTIN等持家基因来校正，比如比较A和B两个家庭的美女多少，A家庭有2美女，共5口人，B家庭有4个美女共20口人，那显然A家庭的美女2/5大于B的1/5。当然在实际操作中我们尽量让内参表达一致，这也目的蛋白的表达量就很直观了，就是说我们两家都是10口人，这样再比较美女的多少就更直观了！ |
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cauzhangtao
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