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蝶谷医仙

新虫 (小有名气)

[交流] 新手弱问,免疫组化和western blot有什么区别

鄙人是实验室新手,以前只做过免疫组化,觉得操作简单,且对蛋白定性很灵敏,利用图像分析软件可以和对照组比较,现在开始学western blot,觉得好复杂啊,而且也只能定性,不明白为什么说这是半定量的方法?请问各位高手,这两种技术具体各有什么区别和优势?能否指点一二,不胜感激。

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-3 at 08:59 ]
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seabird06

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+3,VIP+0):给个红包,谢谢你通俗易懂的讲解 8-18 10:22
两者都可定量,但是各有优势!
免疫组化的优势是可以原位显示目的蛋白的位置,而且可以用长期保存的石蜡切片来做,最近几年的TMA更是免疫组化的发展,可以同时显示几百个病例组与对照组的差别,非常直观!免疫组化主要是显示病例与对照的差别,但是用于定量不如WESTERN准确。
Western是蛋白定量和表达的强力工具,通过对目的蛋白量上的直接测定来检测目的基因的表达,相互样品之间表达量的比较通过ACTIN等持家基因来校正,比如比较A和B两个家庭的美女多少,A家庭有2美女,共5口人,B家庭有4个美女共20口人,那显然A家庭的美女2/5大于B的1/5。当然在实际操作中我们尽量让内参表达一致,这也目的蛋白的表达量就很直观了,就是说我们两家都是10口人,这样再比较美女的多少就更直观了!
2楼2009-08-18 09:20:13
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流,能否讲一下两者的区别呢。 8-18 10:23
是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
3楼2009-08-18 09:52:08
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ljbzd

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by seabird06 at 2009-8-18 09:20:
两者都可定量,但是各有优势!
免疫组化的优势是可以原位显示目的蛋白的位置,而且可以用长期保存的石蜡切片来做,最近几年的TMA更是免疫组化的发展,可以同时显示几百个病例组与对照组的差别,非常直观!免疫组 ...

你的解释太强悍了!! 问一下下再  如果做定位的话 只能用免疫组化吗?还有没有什么先进的好方法啊?
4楼2009-09-01 21:46:17
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