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互补的单链合成双链,进行酶切连接
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闲话寥寥
新虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 13
帖子: 5
在线: 41分钟
虫号: 19733871
注册: 2019-11-14
专业: 蔬菜学与瓜果学
[
求助
]
互补的单链合成双链,进行酶切连接
已有1人参与
请问我现在有两条合成的互补的单链(以引物的形式合成),现在想把它们合成一条双链,然后双酶切连接到另一个载体上。我只需要用ddH2O分别溶解,按1:1混合(浓度,量有要求吗?)95℃退火,降至室温,然后跑胶回收,酶切连接就可以了吗?有没有大神能帮帮忙,万分感谢!!
@
biostar2009
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1楼
2021-08-05 15:34:08
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kangaroo0513
新虫
(正式写手)
MolEPI: 1
应助: 154
(高中生)
金币: 2277.4
散金: 100
红花: 29
帖子: 464
在线: 119.4小时
虫号: 2621902
注册: 2013-08-28
专业: 细胞物质运输
【答案】应助回帖
你为毛不直接合成单链的时候就造成粘性末端???
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3楼
2021-08-09 15:41:52
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tjj451679479
新虫
(小有名气)
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(幼儿园)
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红花: 2
帖子: 224
在线: 62.4小时
虫号: 7320081
注册: 2017-10-18
性别: GG
专业: 生物物理、生物化学与分子
如果这两条单链真的互补,不如加酶和引物扩一下。至少让胶回收的损失少一点。
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2楼
2021-08-09 11:13:11
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