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[求助]
重组质粒挑取单克隆后菌液pcr没有条带，求助大神可能是什么原因，如何排查
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我在基因沉默， 在公司基因合成( PUC57+目的基因)后，我们自己做重组载体( TRV2+目的基因)，双酶切胶回收然后连接转化，这两天在涂平板(50mg/ L Kana+ LB)挑取单克隆，摇菌后菌液pcr，前面的过程都比较顺利，但是菌液pcr就是跑不出条带，一个模糊的条带都没有，求助各位大神是哪里出了问题，如果是空载自连的话，我挑的12个菌都没有条带，而且我连接目的基因与载体的摩尔比是10：1，感觉不太可能。 菌液pcr的酶用的擎科的colony，引物是目的基因的引物，求各位大神指点 @biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端 |
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ken19860823
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2楼2021-07-30 09:58:08