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xiangyuan7816

[交流] 【交流/求助】求助高手指点Tail-PCR

扩了N次Tail-PCR,但都没扩出来,用了师兄给我的体系也没扩出来,请教高手指点体系配方和实验问题关键!

[ Last edited by amisking on 2009-12-22 at 19:16 ]
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boouy

银虫 (正式写手)


xiangyuan7816(金币+1,VIP+0):怎么才知道是引物有问题呢? 8-18 20:05
关键在于特异引物,如果有问题,肯定是扩不出来的,扩增的时候建议I,II,III均检测,然后分析可能的问题。
10楼2009-08-18 13:48:16
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boouy

银虫 (正式写手)


xiangyuan7816(金币+1,VIP+0): 8-20 12:05
关于引物:最基本的是引物设计所依据的序列信息必须是可靠的,否则再好的TAIL-PCR体系都会不work。然后就是引物的退火温度在61-65度之间较好。随即引物也需要尝试若干,提高成功率。
13楼2009-08-20 08:28:37
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