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做快速核酸检测需要知道的那些技术(七)已有1人参与
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继续分享重组酶和聚合酶等温检测过程中需要注意的问题以及相关注意事项。 1. 重组酶和聚合酶等温检测里,引物的3'端稳定性对扩增影响大吗? 影响不是太大,最好按照设计原则里来进行设计。 2. 那么引物3'端稳定性好的是不是更有利于引物与模板的结合? 这个理论上是的。 所以重组酶和聚合酶等温检测里引物的3'端最好要有G或C。 3. 荧光探针的3'端阻断会选择用什么来做阻断呢? 一般的阻断都可以,常用的比如C3-Spacer等。 4. 核酸检测的试纸条是什么样的,识别什么基团? 外观和普通试纸条没区别。 可以识别FAM和生物素。 5. 荧光法重组酶和聚合酶等温检测的平台峰值的荧光强度大小,是不是与扩增的目的产物数量多少有关? 不是,扩增的数量是跟起峰的时间有关。荧光强度大小跟探针的修饰有很大关系。 |
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