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小饼干嘻嘻

新虫 (初入文坛)

[交流] 毕赤酵母GS115诱导表达 已有11人参与

各位大神,目前我在做异源表达,我用的质粒是pPIC9K,转化毕赤酵母GS115之后,培养基选用BMMY,用甲醇进行诱导。
在对发酵液中的蛋白进行浓缩时,选用硫酸铵进行沉淀,但是不知道为什么沉淀之后有黄色的油状物,请问各位老师,这是正常的现象吗?还是我在哪步出现了问题。拜托了

毕赤酵母GS115诱导表达


毕赤酵母GS115诱导表达-1


毕赤酵母GS115诱导表达-2


毕赤酵母GS115诱导表达-3


毕赤酵母GS115诱导表达-4


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yuso

新虫 (初入文坛)


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我用gs115 诱导表达ppiczaA  (和9k一样是a因子) 蛋白表达量贼低几乎没有 跑胶特别淡,请问是什么问题呢。。。两个基因都这样。。。谢谢老板 跪谢了

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5楼2021-08-26 20:53:52
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leilaxx

金虫 (小有名气)


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求一个毕赤酵母的表达蛋白的实验步骤可以吗,谢谢
6楼2021-09-23 09:45:54
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陆地没有尽头

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by leilaxx at 2021-09-23 09:45:54
求一个毕赤酵母的表达蛋白的实验步骤可以吗,谢谢

我有酵母表达手册精译版,你还需要吗

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2021-11-30 10:33:44
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多加辣

新虫 (初入文坛)


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8楼: Originally posted by 陆地没有尽头 at 2021-11-30 10:33:44
我有酵母表达手册精译版,你还需要吗...

请问我可以要一份吗,一直不表达,跑胶条带都看不见了

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9楼2021-12-09 16:17:52
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普通回帖

1928256858

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
底下问题不大,上部不太清楚

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2楼2021-07-11 12:00:19
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
发酵培养基原来啥颜色?褐色的是不是你把葡萄糖和培养基一起高压了,产生的褐变产物?

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VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
3楼2021-07-13 15:42:33
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小饼干嘻嘻

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-07-13 15:42:33
发酵培养基原来啥颜色?褐色的是不是你把葡萄糖和培养基一起高压了,产生的褐变产物?

培养基里有蛋白胨,酵母浸粉

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4楼2021-07-15 10:50:24
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leilaxx

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yuso at 2021-08-26 20:53:52
我用gs115 诱导表达ppiczaA  (和9k一样是a因子) 蛋白表达量贼低几乎没有 跑胶特别淡,请问是什么问题呢。。。两个基因都这样。。。谢谢老板 跪谢了

求一个毕赤酵母的表达蛋白的实验步骤可以吗,谢谢
7楼2021-09-23 09:46:12
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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
正常,是硫酸铵纯度不一导致的。不同批次或不同厂家的硫酸铵只要买的纯度够高 就不会出现黑褐沉淀

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我思故我在
10楼2023-08-03 00:13:55
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