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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 催化 » 催化反应 » 酶-金属级联反应的问题：关于TMB测定葡萄糖浓度的问题？一直不变色？？
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cqq233

铁虫 (初入文坛)

[求助] 酶-金属级联反应的问题：关于TMB测定葡萄糖浓度的问题？一直不变色？？已有1人参与

本人在做酶-金属级联反应的实验：具体是通过葡萄糖氧化酶催化葡萄糖分解产生过氧化氢，然后用四氧化三铁催化过氧化氢分解，过氧化氢分解产生的羟基自由基可以使TMB氧化变成蓝色。分别做这两步都没问题，但一做级联反应，TMB就不显色！有没有遇到相同问题的大佬呀？求解答？？万分感谢！！！
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1楼2021-07-05 21:48:11
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ldd6176

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by cqq233 at 2021-07-06 20:17:36
大佬，是在在ph=6的缓冲溶液中进行的...

我没碰到过这种问题，反应时间延长些吧过夜看看

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4楼2021-07-06 20:55:59
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ldd6176

铁虫 (小有名气)
做级联时用的什么pH，tmb显色一般酸性

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2楼2021-07-06 00:22:16
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cqq233

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ldd6176 at 2021-07-06 00:22:16
做级联时用的什么pH，tmb显色一般酸性

大佬，是在在ph=6的缓冲溶液中进行的
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3楼2021-07-06 20:17:36
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cqq233

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ldd6176 at 2021-07-06 20:55:59
我没碰到过这种问题，反应时间延长些吧过夜看看
...

延长反应时间确实有效，但是酶的催化活性不应该很强吗？为啥显色反应出现的时间这么慢呢
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5楼2021-07-09 16:25:10
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