应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 克隆-吉布森组装-转化板不长
91/1返回列表
查看: 1056  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

静心聆听

新虫 (小有名气)
已领完
克隆-吉布森组装-转化板不长
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫，下载小木虫客户端

目前想将我的目的基因插入到带有嘌呤霉素的质粒上，做吉布森Gibson assembly组装的方法连了一个月了，没有连接成功
如:目的基因是MT，嘌呤霉素基因是pac，质粒为PA
设计同源臂引物：MT-up-F\R；MT-Pac-F\R;MT-dn-F/R;PA-F/R
一共设计4对引物，分别先进性PCR扩增，胶回收，条带正确，然后用胶回收产物进行吉布森组装将三个片段一起连接(MT-up和带同源臂的嘌呤霉素基因MT-pac和MT-dn与PA载体连接，在进行转化
求助的问题CR与胶回收的电泳图条带大小都正确，就是转化完，第二天板子上什么也没长，没有单克隆出现?
不知道问题出在哪里了，有没有小伙伴懂得，帮我分析一下，或者请教探讨一下，谢谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2021-06-26 16:42:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
Angler'2楼
2021-06-26 16:44   回复  
静心聆听(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
Jzhang2133楼
2021-06-26 16:47   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
tzynew4楼
2021-06-26 16:48   回复  
静心聆听(金币+2): 谢谢参与
已获得2个金币 发自小木虫Android客户端
Michael9895楼
2021-06-26 17:02   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
梦想?丰满6楼
2021-06-26 17:02   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
rubychiu7楼
2021-06-26 17:06   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
角动量神秘8楼
2021-06-26 17:10   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
svfh29709楼
2021-06-26 17:13   回复  
静心聆听(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 静心聆听 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭