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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 能否通过电泳用MARKER3估算基因组DNA浓度？
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liuzhu77

铜虫 (初入文坛)

[交流] 能否通过电泳用MARKER3估算基因组DNA浓度？

能否通过电泳用MARKER3作为标准来估算基因组DNA的浓度？
如MARKER3（5ul)1200bp的带与基因组DNA的带亮度一致，能否得出基因组DNA约为100ng？
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1楼 2009-08-13 19:59:37
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liuzhu77

铜虫 (初入文坛)
谢谢！
我用微量分光光度计测定基因组DNA的浓度为90ng/ul,电泳时点样20ul(1800ng)DNA，结果亮度与MARKER3（5ul)1200bp(100ng)带相当，相差17倍，相差如此远？请问，用分光光度计测定时，DNA的浓度为多少比较合适？听说浓度太高误差很大。

[ Last edited by liuzhu77 on 2009-8-13 at 21:45 ]
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3楼2009-08-13 21:37:24
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liujun1028

捐助贵宾 (著名写手)
不可以，不同的品牌marker质量不一样，要用分光光度计
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2楼2009-08-13 21:07:18
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genetics183

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不应该啊，半定量PCR就是依据带的亮度来比较DNA的量。
引用回帖:
Originally posted by liuzhu77 at 2009-8-13 21:37:
谢谢！
我用微量分光光度计测定基因组DNA的浓度为90ng/ul,电泳时点样20ul(1800ng)DNA，结果亮度与MARKER3（5ul)1200bp(100ng)带相当，相差17倍，相差如此远？请问，用分光光度计测定时，DNA的浓度为多少比较合适 ...

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士虽有学，而行为本焉。
4楼2009-08-14 09:10:14
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liuzhu77

铜虫 (初入文坛)
谢谢！
OD260/280是2.02（灭菌去离子水溶解）。有不有可能是降解了，，，？
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6楼2009-08-14 23:48:25
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