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jinyu1124829

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么计算各组分实际加入量

每1L A液含三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl,pH7.5)25mmol,氯化钾50mmol,二硫苏糖醇(DTT)5mmol,乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2,pH8.0) 0.25mmol,Triton X-100 25ml,甘油500ml。配制时,最后添加DTT,混合后分装,-20℃保存,备用。

怎么根据各组分计算试剂成分的加入量

每1L反转录缓冲液含Tris-HCl(pH8.3) 50mmol, 氯化钾 40mmol,氯化镁 6mmol,DTT 2mmol,脱氧核糖核苷酸200μmol,下游引物0.8*10^-3mmol。
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诶_真的嘛

新虫 (小有名气)

首先单位是mM不是mmol,mM=mmol/L。以25mM Tris为例,分子量121.14(单位等效于g/mol),那么1L溶液需加121.14g/mol * 0.025mol/L * 1L = 3.0285g Tris,其它组分同理,最后定容。
或者直接配置高浓度母液,然后稀释,如配置1M的Tris,从中取25ml加入溶液定容至1L就是25mM,这样麻烦一次,以后就方便了。
母液Tris, KCl, DTT, MgCl2建议配1M,EDTA配0.5M

发自小木虫Android客户端
2楼2021-06-09 14:30:22
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