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怎么计算各组分实际加入量
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每1L A液含三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl，pH7.5）25mmol，氯化钾50mmol，二硫苏糖醇（DTT）5mmol，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2，pH8.0） 0.25mmol，Triton X-100 25ml，甘油500ml。配制时，最后添加DTT，混合后分装，-20℃保存，备用。 怎么根据各组分计算试剂成分的加入量 每1L反转录缓冲液含Tris-HCl（pH8.3） 50mmol， 氯化钾 40mmol，氯化镁 6mmol，DTT 2mmol，脱氧核糖核苷酸200μmol，下游引物0.8*10^-3mmol。 |
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首先单位是mM不是mmol，mM=mmol/L。以25mM Tris为例，分子量121.14(单位等效于g/mol)，那么1L溶液需加121.14g/mol * 0.025mol/L * 1L = 3.0285g Tris，其它组分同理，最后定容。 或者直接配置高浓度母液，然后稀释，如配置1M的Tris，从中取25ml加入溶液定容至1L就是25mM，这样麻烦一次，以后就方便了。 母液Tris, KCl, DTT, MgCl2建议配1M，EDTA配0.5M 发自小木虫Android客户端 |
2楼2021-06-09 14:30:22