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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于考马斯亮蓝法测蛋白标准曲线
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泥鱼山

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于考马斯亮蓝法测蛋白标准曲线 已有1人参与

我用的考马斯亮蓝G250,
称取100mg溶于50ml 95%乙醇，再加入100ml 85%磷酸，定容至1L，但是颜色是绿色的。

蛋白溶液用的是牛血清蛋白
称取100mg，定容至100ml

吸光度595nm值都在2以上，用的是分光光度计。

我看文献吸光度值在0.5左右，是哪里出问题了嘛？

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1楼 2021-05-29 19:29:25
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
过滤了吗？
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-05-29 20:08:35
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泥鱼山

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-05-29 20:08:35
过滤了吗？

有真空抽滤

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3楼2021-05-30 22:36:25
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491468278

至尊木虫 (知名作家)

啄木鸟
待测样品有表活或有机溶剂吗？

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虫虫们，我是啄木鸟！
4楼2021-05-31 07:38:27
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491468278

至尊木虫 (知名作家)

啄木鸟
引用回帖:
4楼: Originally posted by 491468278 at 2021-05-31 07:38:27
待测样品有表活或有机溶剂吗？

考马斯亮蓝测蛋白，本质上是蛋白质提高了考卡斯亮蓝“分子”溶解在水中

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虫虫们，我是啄木鸟！
5楼2021-05-31 07:40:31
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 泥鱼山 at 2021-05-30 22:36:25
有真空抽滤
...

用甲醇溶解以后就过滤，不要稀释定容后再过滤。定容后再过滤就容易配出来是绿色的
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
6楼2021-05-31 10:18:29
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超微

铜虫 (初入文坛)
我测的100微克/ml的BSA溶液吸光度是0.5左右，1mg/ml的浓度是不太大了。
我配的G250没出现过绿色。。不知道为啥会出现绿色。但是发现酸性溶液可能会使得染色液变成绿色
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7楼2021-07-05 16:19:04
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