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新虫 (初入文坛)

[交流] pcr问题～已有2人参与

pcr跑完30圈直接拿出来不等最后五分钟的延伸有什么影响？不等降温有什么影响？会导致之前p不出来吗？谢谢啦

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1楼 2021-05-26 19:18:19

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铁虫 (初入文坛)

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PCR延伸反应的时间，可根据待扩增片段的长度而定，一般1Kb以内的DNA片段，延伸时间1min是足够的。3～4kb的靶序列需3～4min；扩增10Kb需延伸至15min。延伸进间过长会导致非特异性扩增带的出现。对低浓度模板的扩增，延伸时间要稍长些。

2楼2021-05-27 09:41:59

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版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

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所有循环都结束以后的几分钟延伸可以省去，不会影响结果

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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.

3楼2021-05-27 12:39:57

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