应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 请问重叠延伸PCR怎么构建缺失突变质粒呀，具体怎么做
51/1返回列表
查看: 1322  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Eari

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问重叠延伸PCR怎么构建缺失突变质粒呀，具体怎么做 已有1人参与

求问用重叠延伸PCR怎么构缺失突变质粒，打算构缺失42bp的突变质粒，现在已经设计了突变引物，但具体操作不知道该怎么做，新手小白求帮助

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-05-22 21:03:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
跟做定点突变一样的方法
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-05-23 09:15:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Eari

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-05-23 09:15:31
跟做定点突变一样的方法

您好，我没做过定点突变，可以说详细一点吗？需要试剂盒吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-05-23 10:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by Eari at 2021-05-23 10:31:59
您好，我没做过定点突变，可以说详细一点吗？需要试剂盒吗？
...

参考这个试剂盒的说明书：https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/public/200523.pdf
但是不用买他的试剂盒，用自己有的高保真pcr酶就行。
如果做不出来可以考虑在要删除的区域用任意限制性内切酶先切一下（如果有特异性位点的话），会大大提高效率。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Eari
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-05-23 12:25:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Eari

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-05-23 12:25:47
参考这个试剂盒的说明书：https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/public/200523.pdf
但是不用买他的试剂盒，用自己有的高保真pcr酶就行。
如果做不出来可以考虑在要删除的区域用任意限制性内切酶先切一 ...

好的，非常感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2021-05-23 20:04:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Eari 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856化工原理 +4 z2839474511 2026-03-10 4/200 2026-03-11 16:49 by 2020015
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +9 我想读研11 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:42 by 看开一点
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +3 jiaanl 2026-03-11 3/150 2026-03-11 16:34 by allen-yin
[考研] 341求调剂 +3 捣蛋猪猪 2026-03-11 3/150 2026-03-11 15:39 by 30660438
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工296分求调剂 +14 稻妻小编 2026-03-09 16/800 2026-03-11 13:49 by laoshidan
[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +3 yansheng@211 2026-03-09 4/200 2026-03-11 10:52 by @飒飒飒飒
[考研] 327求调剂 +3 Ffff03 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:30 by macy2011
[考研] 085600 材料与化工 295 求调剂 +9 dream…… 2026-03-10 9/450 2026-03-10 22:24 by 剑诗杜康
[考博] 找博导 +4 小呆呆熊 2026-03-07 4/200 2026-03-10 11:08 by 天道酬勤2026686
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
[考研] 070300化学求调剂 +5 扑风铃的猫 2026-03-08 10/500 2026-03-09 13:58 by macy2011
[考研] 求调剂，一志愿江南大学，食品科学与工程，总分，320 +3 yyyyyukino 2026-03-07 3/150 2026-03-08 23:07 by 清风月
[考研] 288求调剂085600材料与化工 +13 Daunrin 2026-03-07 15/750 2026-03-08 19:10 by 加号+
[基金申请] 进入个人成果库好难，一下午都没进去 +6 mi_dilee 2026-03-05 6/300 2026-03-08 11:43 by lan111
[考研] 085701环境工程317分求调剂 +9 6汆尼9 2026-03-07 9/450 2026-03-08 06:41 by 刘兵
[考研] 诚求调剂，323分 有专利/科研/实习经历 +6 橙子cyx 2026-03-06 8/400 2026-03-07 19:06 by 新篇章DFSS
[考研] 2026调剂】考试A区0703化学类323分 诚求接收 +3 卷柏卷柏 2026-03-05 4/200 2026-03-07 17:00 by yuandd_2001
[考研] 268求调剂 +4 刘合华 2026-03-05 4/200 2026-03-06 11:18 by lature00
[考研] 考研282分求调剂，接受跨专业 +4 刘淄博 2026-03-04 7/350 2026-03-05 22:56 by 刘淄博
[考研] 求材料调剂 +4 berdmond 2026-03-05 4/200 2026-03-05 19:45 by 黑衣馒头人
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭