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做快速核酸检测需要知道的那些技术（三）
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今天继续分享关于重组酶和聚合酶等温检测的灵敏度，特异性以及其对模板要求等相关信息。 1、重组酶和聚合酶等温检测的灵敏度如何？ 特异性如何？ 重组酶和聚合酶等温检测在理论上可实现对1个拷贝的检测，在实际检测过程中，其灵敏度不低于甚至高于PCR的灵敏度。重组酶和聚合酶等温检测的引物长度要求不低于30bp，比PCR引物长度长，特异性不低于PCR。 2、重组酶和聚合酶等温检测是否可实现多重扩增检测？ 可以。重组酶和聚合酶等温检测技术支持在同一个管中同时进行多个扩增反应。不过，多重的引物探针等需要精心设计，以便每个引物探针都够有效的工作。 3、重组酶和聚合酶等温检测反应单元的保质期是多久？ 重组酶和聚合酶等温检测反应单元在4℃下可保存1个月左右；如果长期保存，建议放置在-20℃下进行保存，可保存半年以上。 4、重组酶和聚合酶等温检测反应能对模板进行定量么? 可以。可根据模板扩增起峰的时间来进行定量。具体来说，起峰时间的快慢，依赖于反应起始时的模板量。初始模板的拷贝越多，起峰时间就越快。 不过，这种定量需要精心的实验安排，确保反应是同时开始的。如可以利用镁离子的添加时间进行控制。镁离子一旦进入体系，重组酶和聚合酶等温检测反应就会开始。此外，较慢的扩增过程有助于更精确的定量，可以通过调整反应条件或引物设计来减慢重组酶和聚合酶等温检测的反应速度。 5、重组酶和聚合酶等温检测对模板有什么具体的要求？ 重组酶和聚合酶等温检测的模板无特殊的要求，可用于PCR的模板都可以用来进行重组酶和聚合酶等温检测扩增，并且重组酶和聚合酶等温检测比PCR更能忍受粗提取的模板。 |
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