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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母电转

请问为什么我的x33毕赤酵母,电转pPICZaA和pPIC9k质粒,涂到YPD药板上,不长菌?不知道哪里出错了。(不好意思各位,新人金币有限)

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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

几天不长?ppic9k不应该涂YPD。应该是MD。

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2楼2021-05-16 15:08:40
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-05-16 15:08:40
几天不长?ppic9k不应该涂YPD。应该是MD。

第二天了,培养基快干了都,那aA涂YPD也不长,还有啥原因呀

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3楼2021-05-16 15:39:10
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abcjlm

铜虫 (小有名气)

电转后你培养多久涂的板
4楼2021-05-16 16:47:21
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sadpotato

铁虫 (初入文坛)

我也是X33,做过三四次电转了,只有在第四五天长出来一两个,但在液体YPD里长不起来...

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5楼2021-06-18 15:11:00
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abcjlm

铜虫 (小有名气)

你仔细研究一下毕赤酵母表达手册,这些都是比较基础的操作,而且电转效率较高。
6楼2021-06-18 17:27:16
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by abcjlm at 2021-05-16 16:47:21
电转后你培养多久涂的板

培养了3小时

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7楼2021-06-22 15:44:02
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sadpotato at 2021-06-18 15:11:00
我也是X33,做过三四次电转了,只有在第四五天长出来一两个,但在液体YPD里长不起来...

我把aA质粒又点转了一次,培养了3,4天终于长了

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8楼2021-06-22 15:45:58
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by abcjlm at 2021-06-18 17:27:16
你仔细研究一下毕赤酵母表达手册,这些都是比较基础的操作,而且电转效率较高。

好的,谢谢

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9楼2021-06-22 15:46:17
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sadpotato

铁虫 (初入文坛)

是不是X-33对G418比较敏感呢?我做pPIC3.5k电转到X-33,在含药平板上长的也非常慢,在液体里几乎长不起来。不知道是不是该换个载体用zeocin来筛选。

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10楼2021-10-01 14:06:40
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