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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母电转
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母电转

请问为什么我的x33毕赤酵母，电转pPICZaA和pPIC9k质粒，涂到YPD药板上，不长菌？不知道哪里出错了。（不好意思各位，新人金币有限）

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1楼 2021-05-16 14:50:29
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
几天不长？ppic9k不应该涂YPD。应该是MD。

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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2021-05-16 15:08:40
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-05-16 15:08:40
几天不长？ppic9k不应该涂YPD。应该是MD。

第二天了，培养基快干了都，那aA涂YPD也不长，还有啥原因呀

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3楼2021-05-16 15:39:10
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abcjlm

铜虫 (小有名气)
电转后你培养多久涂的板
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4楼2021-05-16 16:47:21
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sadpotato

铁虫 (初入文坛)
我也是X33，做过三四次电转了，只有在第四五天长出来一两个，但在液体YPD里长不起来...

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5楼2021-06-18 15:11:00
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abcjlm

铜虫 (小有名气)
你仔细研究一下毕赤酵母表达手册，这些都是比较基础的操作，而且电转效率较高。
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6楼2021-06-18 17:27:16
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by abcjlm at 2021-05-16 16:47:21
电转后你培养多久涂的板

培养了3小时

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7楼2021-06-22 15:44:02
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by sadpotato at 2021-06-18 15:11:00
我也是X33，做过三四次电转了，只有在第四五天长出来一两个，但在液体YPD里长不起来...

我把aA质粒又点转了一次，培养了3，4天终于长了

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8楼2021-06-22 15:45:58
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科研贼爱我

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by abcjlm at 2021-06-18 17:27:16
你仔细研究一下毕赤酵母表达手册，这些都是比较基础的操作，而且电转效率较高。

好的，谢谢

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9楼2021-06-22 15:46:17
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sadpotato

铁虫 (初入文坛)
是不是X-33对G418比较敏感呢？我做pPIC3.5k电转到X-33，在含药平板上长的也非常慢，在液体里几乎长不起来。不知道是不是该换个载体用zeocin来筛选。

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10楼2021-10-01 14:06:40
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