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[交流]
做快速核酸检测需要知道的那些技术（二）
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今天接着来聊一聊重组酶和聚合酶等温检测，上次聊了重组酶和聚合酶等温检测的原理、特点、应用等，下面谈谈相关的引物、探针等其他信息。 1、PCR 引物可以用于重组酶和聚合酶等温检测吗？ 可以。具有PCR常用长度(例如18-23 bp)的引物可很好地用于重组酶和聚合酶等温检测。不过反应可能会稍慢，如果想要快速扩增，建议使用稍微长一些的引物（长度最好大于30 bp）。 2、PCR探针可以用于重组酶和聚合酶等温检测吗？ 不可以，大部分利用聚合酶的 5’-3’核酸酶活性的探针不能用于重组酶和聚合酶等温检测。 3、重组酶和聚合酶等温检测扩增片段大小？ 重组酶和聚合酶等温检测体系主要是针对快速扩增而设计的，一般扩增片段不超过500 bp。 4、重组酶和聚合酶等温检测需要几条引物？几条探针？ 重组酶和聚合酶等温检测同PCR一样，需要两条引物，如果引入探针，需要一条探针，探针位置同PCR一样，位于两条引物之间。 5、重组酶和聚合酶等温检测在反应时，需要特殊的仪器吗？ 不需要。对基础试剂盒而言，只要温度能控制在37°C即可。进行实时监控的体系，需要能够激发和检测荧光团的恒温装置。 |
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