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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 同样的模板，同样的条件试剂，隔了一周就死活扩不出目的条带了
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makotoichi

铜虫 (初入文坛)

[求助] 同样的模板，同样的条件试剂，隔了一周就死活扩不出目的条带了 已有1人参与

纯菌菌液提取的基因组dna作为模板，25微升体系，目的条带片段大小约350bp，上周都能扩到清晰目的条带，但这周重新跑就一直扩不出来了，只有杂带，marker2000很清晰应该不是跑胶的问题。求解为什么，更换新的试剂、引物、水跑了七八遍了还是没有，退火温度也从50-60℃都尝试过了。PCR反应条件为：94℃/10 min; 94℃/30 s, 55℃/40 s, 72℃/1 min, 35个循环; 72℃/10 min。

同样的模板，同样的条件试剂，隔了一周就死活扩不出目的条带了


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1楼 2021-05-06 20:24:19
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2021-06-21 16:04:53
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琛琛：

新虫 (正式写手)
重新提取dna试试？

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2楼2021-05-06 20:36:57
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我是唯一5468

新虫 (小有名气)
是不是模板浓度降低了

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4楼2021-06-22 17:24:03
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