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kevin.wee

金虫 (小有名气)

[交流] 请教荧光定量PCR

最近在做荧光定量方面的工作,使用两个不同酶MIX的时候,酶A、酶B,同样的模版和引物,同样的标准品,同样的sample
对于酶A,使用25ul体系,模板加5ul
对于酶B,使用10ul体系,模版加2ul
各做三个平行,反应条件一致。

反应结果,两个体系所测得sample拷贝数差别却很大,酶B体系测得量远大于酶A体系测得量,不知道原因出在什么地方,请高人帮忙分析指点,非常感谢!
(注:sample 为石蜡切片提取,会有酶抑制剂的存在)
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