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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 酵母菌落验证
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风中的一棵树

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 酵母菌落验证 已有1人参与

我最近在做酵母菌落验证，酵母是营养缺陷型，用测序的引物做PCR,空载的酵母可以P出条带，但连接基因的都P不出来，想不明白是为什么，请问大家有什么好的建议？

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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1楼 2021-04-22 09:44:34
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hongkunqiang

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你是在质粒上表达的么？有没有胶图
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

风中的一棵树
生物，基因，发酵,合成生物学
2楼2021-04-23 18:02:30
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abcjlm

铜虫 (小有名气)
基因的大小，反向插入，插入后丢失，原基因与酵母基因同源性过高
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3楼2021-04-24 13:43:33
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风中的一棵树

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hongkunqiang at 2021-04-23 18:02:30
你是在质粒上表达的么？有没有胶图

是公司测序提取的质粒转化到了酵母

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4楼2021-04-24 13:53:01
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风中的一棵树

铁杆木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by hongkunqiang at 2021-04-23 18:02:30
你是在质粒上表达的么？有没有胶图

很亮的是空载体，其他什么都没有，请问传代过程中质粒会丢吗？
酵母菌落验证



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5楼2021-04-24 17:10:42
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hongkunqiang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 风中的一棵树 at 2021-04-23 21:10:42
很亮的是空载体，其他什么都没有，请问传代过程中质粒会丢吗？

...

如果是质粒传代没有压力会丢失，整合还是很稳定的。
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生物，基因，发酵,合成生物学
6楼2021-04-25 17:12:56
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