10楼: Originally posted by goblin7 at 2021-04-03 07:50:40
enmmmm那应该是flag
我的我的
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8楼: Originally posted by 清若123456 at 2021-04-02 22:11:44
噢噢，大神你的意思是N端加标签就加在上游引物，C端标签加在下游引物对吧？
我之前看到N端加的蛋白标签在引物序列之前，那我这个C端的蛋白标签在引物后面还是前面啊？是下面这样吗？（新手，问题比较小白，大神您 ...

12楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-03 07:57:26
注意终止密码子的位置。
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11楼: Originally posted by goblin7 at 2021-04-03 07:54:34
还有你上面的那个问题，我一般用软件设计，如果你人工设计，有一个算是小技巧吧。
就你就跟上游一样设计下游，然后反向互补送公司合成就行了
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14楼: Originally posted by 清若123456 at 2021-04-03 12:32:21
引物设计我也用的Prime5软件，师姐跟我说设计完把保护碱基酶切位点加上去就行。迷惑的点就是蛋白标签位置应该加在哪里？师姐她之前也没有这个经验。大神，那你这层楼的意思我没大懂。你看可以顺序可以这么来吗 ...

15楼: Originally posted by goblin7 at 2021-04-03 16:11:55
酶切位点没错的话，俺觉得应该是对的
你记得"反向互补"哈
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