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echo-lee520

木虫 (小有名气)

[交流] 如何将DNA双链固定在玻片上

本人现欲将500bp左右的DNA双链(5‘需要固定,3’ 还有10nt左右的overhang序列)固定在玻片上,然后再加上些蛋白、特定小分子之类的因子孵育后再进行TIRF检测。
我了解到可以用生物素固定的方法,但其中具体的条件不是很清楚,比如:玻片如何进行预处理等。
这是本小虫第一次做实验设计,请各位前辈多多指点,特别是在DNA固定方面有经验的前辈们能给点建议。谢谢先!
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


可以参照SPR的方法
2楼2009-08-07 18:46:13
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xuezhen

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你是要做什么的?做切片吗?做切片,新的玻片可以用2%的盐酸酒精(100份95%酒精加盐酸2份)浸泡几小时或过夜,再用流水冲净,浸于95%酒精中备用,用时用绸布擦干。旧的要用洗衣粉在沸水中煮一下,使胶脱落,然后浸于清洁剂(重铬酸钾20g,100ml工业用浓硫酸,蒸馏水100ml,可重复利用,直至变成蓝黑色)中浸泡30min以上,泡后用流水冲洗干净,蒸馏水洗下,浸于95%酒精备用,用时绸布擦干。
3楼2009-08-08 09:53:10
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