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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 急!从农杆菌提取质粒转化大肠杆菌

有人做过从农杆菌提取质粒转化大肠杆菌的实验吗?是用的热激转化法吗?成功率高吗?有什么要特别注意的事项吗?
为什么我最近做的老是转不进去,心烦那!

[ Last edited by muyuan on 2009-8-6 at 21:40 ]
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shensc727

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
热激法效率不是很高,但是应该可以满足实验的需要!!!
目前,很多都是用电击转化了!!!电转化效率比较高!建议楼主尝试一下!
热激法,主要是热激温度和热激时间的控制要精确!热激温度和时间是关键!!!  
祝实验顺利!
2楼2009-08-06 21:55:01
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轻5飞扬

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
农杆菌质粒回转就是普通的转化啊,前提你农杆菌的质粒提出来了,呵呵,正常热激没有问题的
3楼2009-08-07 09:18:23
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shuaiger

木虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
据说农杆菌质粒拷贝数很低的
4楼2009-08-12 17:35:01
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aga0110125

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
相对大肠杆菌来说是比较低,但是转化是绝对够用了的
5楼2009-08-13 10:19:09
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xiaoyadxy

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只要农杆菌质粒能提出来提出来了,转化大肠杆菌热激没什么问题的,跟普通的转化一样。
但农杆菌质粒的拷贝数很低,多提点就是了
6楼2009-08-13 11:28:57
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