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biogate21

铁虫 (正式写手)

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专业: 生物大分子结构与功能

[交流] 用8M尿素溶解的包涵体，测蛋白浓度尿素有无影响

用8M尿素溶解的包涵体，测蛋白浓度尿素有无影响

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1楼 2009-08-06 09:59:30

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wmg2007

金虫 (初入文坛)

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虫号: 439733
注册: 2007-10-20
专业: 蛋白质组学

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

用bradford来测蛋白浓度，几乎没有影响，你可以查一查蛋白质技术手册，上面介绍的很详细

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2楼2009-08-06 12:44:08

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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

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司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 8-6 15:33

Lowry法测BSA，100 uL样品， 5mL总测定体积。
单纯的尿素4M 的我试过，没有一点影响。

但是，包涵体溶解用的，就不是只有尿素了吧。这里面可能有Tris 和还原剂等。

Tris 10mM 就可导致吸光值明显上升！

1 uM 的巯基乙醇 100 uL 可检测到很高的吸光值，好像有0.5左右。

可见不是因为尿素有很高的浓度，就是主要影响因素的啊。

所以，LZ

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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】

3楼2009-08-06 15:22:08

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