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ice-2008

金虫 (小有名气)

[交流] 请教植物丙二醛含量测定

最近在测定植物叶片中MDA含量,在沸水加热过程中总是出现沉淀,不知是否正常?如果不正常,可能是什么问题呢?
我用的方法是先用50mM pH7.5的磷酸缓冲液提取酶液,然后用0.5%的硫代巴比妥溶于10%TCA加热显色,就是在显色过程中出现问题了,没有生成红棕色物质,反而越发变黄而且出现沉淀,但是冷却终止反应时黄色消失,略微有点偏红色,但是很浅。
希望大家多多指点!

[ Last edited by amisking on 2009-8-5 at 19:17 ]
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小太阳3369

木虫 (著名写手)

悠悠我心


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该没有太大问题,我测得时候也是出现沉淀物
至于颜色的转变,10%的巴比妥酸本身就有些黄色,我觉得可能和你取样的部位有关系吧,如果取的是叶子,有没有可能是叶绿素干扰呢
(*^__^*)嘻嘻……
2楼2009-08-05 23:28:20
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xixilulu

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
步骤应该没有问题的,出现沉淀是正常的,我测定时候沉淀是红色的。  至冷却反应结束时沉淀也没有消失,溶液最终为微红色或者粉红色。

所以楼主不必担心,可能你的样品中MDA含量较低,导致溶液颜色较浅。
3楼2009-08-06 20:17:15
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