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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » BstNI的酶活问题
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fanxinying6042

银虫 (小有名气)

[交流] BstNI的酶活问题

目前正在使用的BstNI做酶切总出问题，我们是这样做的 ：从石蜡组织中提取基因组，然后做pcr,回收后做酶切，同样的体系和条件，另外一种酶的活性很好，都能切开，但是BstNI经常会出现酶切不完全的问题，请问各位高手为什么呢?

[ Last edited by amisking on 2009-8-5 at 18:41 ]
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1楼 2009-08-05 11:06:42
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chg952

金虫 (小有名气)
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
支持一下,会不会是酶活问题?我也是新手,呵呵
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2楼2009-08-05 13:26:16
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yy0520yy

金虫 (职业作家)
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
不一样才有创新点啊，好好研究一番。
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3楼2009-08-05 14:45:48
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
用的是什么公司的酶
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4楼2009-08-05 15:38:12
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tanlaixun

禁言 (知名作家)
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
本帖内容被屏蔽
5楼2009-08-05 18:11:20
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★ ★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
fanxinying6042(金币+1,VIP+0): 8-5 20:43
酶本身的活性问题吧 或者是缓冲体系不对
跟PCR之前的步骤没关系（只要确有这个酶切位点）
赞一下(7人) 回复此楼
从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
6楼2009-08-05 20:07:59
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司马诸葛

木虫 (正式写手)
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
帮顶
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7楼2009-08-05 20:32:50
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fanxinying6042

银虫 (小有名气)
用的是什么公司的酶
NEB的

好好查查文献
查了好多文献。都是这个酶。。。。。。

酶本身的活性问题吧 或者是缓冲体系不对
跟PCR之前的步骤没关系（只要确有这个酶切位点）
缓冲体系没问题啊，按照说明来的，确有这个酶切位点
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8楼2009-08-05 20:47:44
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
酶切产物有没有纯化过？
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9楼2009-08-05 23:19:57
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
fanxinying6042(金币+2):谢谢参与
不知道这个酶对甲基化是不是比较敏感
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2009-08-05 23:40:19
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