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jqwhy.

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC含量测定中的出峰时间

请大家提供帮助:

    在HPLC含量测定中(甲醇-水60:40,70:30),我的样品在选择波长为232nm,254nm时候主要出现两个峰,并且在4分钟内都出来了,那么测定的结果能说明问题不?
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naren4545

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好增加水的比例,在5-10分钟出峰较好!
2楼2009-08-05 09:56:45
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solocheng

荣誉版主 (文坛精英)

黑洞洞主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这说明:
1, 恭喜你,你的样品在这两个波长下都有吸收,所以可选一个最大吸收波长来做
2, 你的样品属于极性比较大的物质,如果只是定量,而且你要的东东分离度不错,这样的retention time 还是可以的。不过不知道你的柱子是什么类型的,如果你的溶剂峰是在2min出来,而你的样品也是,那就不可以了,当然4min的时间,你的样品想必应该还算纯吧,如果不是,ok, 楼上的说法是对的,增加retention time。

综合上述,测试的结果基本可以说明问题~~~ 这也从另一个侧面反应了 用HPLC-UV定量的不足之处~~ 所以一直流行lc-ms定量~~~

[ Last edited by solocheng on 2009-8-5 at 10:00 ]
你来了,我信你不会走;你走了,我当你没来过。
3楼2009-08-05 09:57:09
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zfj0915

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的问题没有说清楚,不过,显而易见,出得太快了。C18柱吗?增加水比例试试吧。
4楼2009-08-05 10:37:41
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xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最好目标峰出峰时间控制在5分钟后,10分钟前。
5楼2009-08-05 10:44:55
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cucupig

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩,问题有点含糊,不过显然出峰太早了,最好能够把保留时间往后退,不然不能用于定量分析的。
6楼2009-08-05 11:36:00
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grxzjj

金虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提高水的比例,推迟出峰时间。
7楼2009-08-05 12:40:24
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
只要没有杂质峰干扰,保留时间长短都可以。
8楼2009-08-05 12:56:34
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liugang66

铁杆木虫 (职业作家)

小鸟伯德


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by solocheng at 2009-8-5 09:57:
这说明:
1, 恭喜你,你的样品在这两个波长下都有吸收,所以可选一个最大吸收波长来做
2, 你的样品属于极性比较大的物质,如果只是定量,而且你要的东东分离度不错,这样的retention time 还是可以的。不过不知 ...

原来是这样
有梦就有力量,有心就会成功!
9楼2009-08-05 13:14:38
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djc9801

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
兄弟,这是最起码做液相的技术问题,我看你还是学学怎么做液相吧。怎么样出峰合适,如何调节溶剂比例来改变出峰时间。
10楼2009-08-05 13:50:43
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