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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 我的微滤有没有问题啊
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hilaryyyy

银虫 (小有名气)

[交流] 我的微滤有没有问题啊

本人做的是发酵液的HPLC，目标物质的分子量大概645左右，发酵液的处理方法是，先离心10min，12000rpm，取上清，与等体积的流动相（乙腈和磷酸盐）混合，有沉淀产生，再离心10min
然后用微滤膜微滤，本人用的是0.45的有机膜，有没有问题？
还是应该用水膜微滤？
另外水膜与有机膜分别用于什么？区别大吗？？
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二十一世纪什么最贵，人才！
1楼 2009-07-31 12:48:23
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-1 09:27
hilaryyyy(金币+1,VIP+0): 12-18 22:47
当然不能用水性的滤膜啊，有机溶剂的就要用有机滤膜，只有水溶液就用水性的滤膜。
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2楼2009-07-31 13:13:10
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your2007

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-1 09:27
hilaryyyy(金币+1,VIP+0): 12-18 22:47
只要你的乙腈是分析纯的，只过滤发酵液就可以了，不过你的流动相选的是不是有问题啊，我们一般发酵液微孔滤膜过滤后就直接进样了，
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爱人者被爱，敬人者人敬
3楼2009-07-31 14:20:32
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hilaryyyy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2009-7-31 13:13:
当然不能用水性的滤膜啊，有机溶剂的就要用有机滤膜，只有水溶液就用水性的滤膜。

不是啊，我的样品处理中，只是有乙腈，不是主要是有机相啊，说起来其实主要是水相的啊，只是不清楚像这种情况，就是水相与有机相混合应该用什么膜合适
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二十一世纪什么最贵，人才！
4楼2009-07-31 14:24:34
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hilaryyyy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by your2007 at 2009-7-31 14:20:
只要你的乙腈是分析纯的，只过滤发酵液就可以了，不过你的流动相选的是不是有问题啊，我们一般发酵液微孔滤膜过滤后就直接进样了，

乙腈肯定是HPLC 专用的啊，没有尝试过直接微滤进样，下午试试要不
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二十一世纪什么最贵，人才！
5楼2009-07-31 14:29:10
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qwj_1001

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-1 09:27
hilaryyyy(金币+1,VIP+0): 12-18 22:46
主要看你发酵液是水相还是有机相，也就是极性与非极性的区别。
一般来说是水相的，但是跑液相需要对样品进行处理所以也可能变成有机相的，关于你所说的我推测是水相的
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我们来自五湖四海为了一个目标聚集在这里，使我们获得知识。
6楼2009-07-31 14:36:59
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fruit

木虫 (小有名气)
★
hilaryyyy(金币+1,VIP+0): 12-18 22:46
还是看看你的目标物质是水溶性的还是乙睛溶的，培养液最好还是用水容比较好。
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7楼2009-07-31 14:50:51
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hilaryyyy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fruit at 2009-7-31 14:50:
还是看看你的目标物质是水溶性的还是乙睛溶的，培养液最好还是用水容比较好。

目标物是糖，肯定是水溶的，我以为也可以不加流动相稀释，直接进样
但是加入流动相以后，会有沉淀产生，相当于除杂嘛，所以就进行了这一步
至于为什么会产生沉淀，肯定是乙腈的原因，但具体为什么不太清楚
望指点
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二十一世纪什么最贵，人才！
8楼2009-07-31 22:04:15
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
hilaryyyy(金币+1,VIP+0): 12-18 22:46
LZ的操作是对的
不同液体混合时是可能产生沉淀的，要是沉淀发生在柱子上就麻烦了
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9楼2009-08-01 08:28:17
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hilaryyyy

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-8-1 08:28:
LZ的操作是对的
不同液体混合时是可能产生沉淀的，要是沉淀发生在柱子上就麻烦了

我在想，产生浑浊的原因是不是一些胞外的蛋白加入乙腈以后变性啦
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二十一世纪什么最贵，人才！
10楼2009-08-01 21:14:57
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