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21817085

新虫 (初入文坛)

[交流] 细菌/培养基/蛋白质含量 已有1人参与

请问有人测过细菌在培养过程中培养基的蛋白质含量的变化吗?细菌培养一段时间后,离心取上清,我用考马斯亮蓝测上清液的OD595nm,发现OD值没什么变化,是为什么呢?谢谢

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21817085

新虫 (初入文坛)

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4楼: Originally posted by 小冀- at 2021-03-01 10:10:08
蛋白质不需要纯化,直接测就行。蛋白浓度怎么样?不会是在本底反应的误差范围内吧?如果不是的话,会不会是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小...

培养基的蛋白质菌株肯定能利用吧?我没有测具体的浓度,直接测了od值,因为只是想看一个变化的趋势。做蛋白表达的时候不是要做蛋白纯化再测浓度吗,我在想是不是因为培养基里的其他物质影响了蛋白质的检测。
5楼2021-03-01 15:30:45
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小冀-

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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个很难说明问题吧,培养基里面的蛋白会被分解利用,但是细菌死亡之后也会释放蛋白质,这样测只能看个大概吧,感觉说明不了问题,除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别
···
2楼2021-02-26 13:25:24
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新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by 小冀- at 2021-02-26 13:25:24
这个很难说明问题吧,培养基里面的蛋白会被分解利用,但是细菌死亡之后也会释放蛋白质,这样测只能看个大概吧,感觉说明不了问题,除非培养基中的蛋白质含量培养前后有明显的差别

虽然细菌死亡会释放蛋白质,但理论上蛋白质消耗量比释放量多,毕竟细菌在生长,对吧?但是按照这个理论,我测不出蛋白质含量的变化,是因为检测方法的问题吗?还是离心完要进行蛋白质纯化?
3楼2021-02-28 14:04:51
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小冀-

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3楼: Originally posted by 21817085 at 2021-02-28 14:04:51
虽然细菌死亡会释放蛋白质,但理论上蛋白质消耗量比释放量多,毕竟细菌在生长,对吧?但是按照这个理论,我测不出蛋白质含量的变化,是因为检测方法的问题吗?还是离心完要进行蛋白质纯化?...

蛋白质不需要纯化,直接测就行。蛋白浓度怎么样?不会是在本底反应的误差范围内吧?如果不是的话,会不会是大分子蛋白,菌株根本不能利用或利用量很小
···
4楼2021-03-01 10:10:08
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