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sweet5210

新虫 (初入文坛)

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虫号: 17456835
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专业: 卫生分析化学

[求助] 相对定量还是绝对定量分不清楚，跪求问题，重赏！！！已有2人参与

跪求请问这段话描述的到底是相对定量pcr还是绝对定量pcr，在网上查了很多资料说相对的不需要标曲，想像他一样获得细胞中mRNA的含量完全不知道什么意思，不做这个相关的，只想要这一小部分数据，跪求回答，快毕业了好头疼。

“通过测定 control RNA(在 Revert Aid First Strand c DNA合成试剂盒的人GAPDH m RNA)的标准曲线，将Ct 值转化成绝对GAPDH 拷贝数。
标准曲线通过配制不同浓度的control RNA通过同样条件的逆转录和 q PCR定量得到。每个浓度均重复测定三次。通过计数的细胞个数，得到细胞内平均的
GAPDH的拷贝数。细胞内的mRNA ACTB 和 TK1 参照 GAPDH 表达量，通过 2–ΔΔCt方法计算得到”

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顺利毕业！！！

1楼 2021-02-25 15:29:06

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owl2010

金虫 (正式写手)

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虫号: 1338696
注册: 2011-07-06
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

相对定量因为没有做标准曲线，细胞内基因的表达量mRNA ACTB 和 TK1 只能相互比较。在相对定量中，要么以ACTB的表达量为标准（一般默认为1），TK1相对于ACTB的表达量为多少，要么以TK1的表达量为标准，ACTB的表达量为多少。

绝对定量因为有标准曲线，mRNA ACTB 和 TK1 都可以通过比较标准曲线计算出表达量。即以标准曲线的表达量为标准，mRNA ACTB 和 TK1 的表达量为多少。