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小薇6702

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】该怎样清洗色谱柱?

请问我用的是氨基柱,流动相是乙腈:磷酸二氢钾缓冲液(ph=4) 65:35
该用什么方法来冲洗色谱柱,而延长柱子使用寿命。
谢谢!
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naren4545

木虫 (正式写手)

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乙腈:0.5%氨水溶液(65/35)
2楼2009-07-29 15:21:06
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cucupig

银虫 (小有名气)

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用了缓冲盐的色谱柱冲洗时候关键是起始要用高比例的水冲洗,防止盐析出,可以试试梯度洗脱:
0 min   甲醇或乙腈:水 15:85
15 min 甲醇或乙腈:水 15:85
20 min 甲醇或乙腈:水 80:20
30 min 甲醇或乙腈:水 100:0
最后柱子保留在纯有机溶剂里(甲醇或乙腈)
3楼2009-07-29 15:39:31
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜

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引用回帖:
Originally posted by cucupig at 2009-7-29 15:39:
用了缓冲盐的色谱柱冲洗时候关键是起始要用高比例的水冲洗,防止盐析出,可以试试梯度洗脱:
0 min   甲醇或乙腈:水 15:85
15 min 甲醇或乙腈:水 15:85
20 min 甲醇或乙腈:水 80:20
30 min 甲醇或乙腈: ...

氨基柱是不是也可以这么冲呢?觉得还是楼上的方法保险点
我为新生
4楼2009-07-29 16:18:52
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小小木船

铜虫 (职业作家)

忘记中

基本上大家都说了
5楼2009-07-29 19:41:08
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cucupig

银虫 (小有名气)

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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢参与 8-1 08:23
氨基柱是在C18固定相上面键合了氨基,如果用碱性流动相冲洗是很容易损坏固定相的,0.5%的氨水碱性其实已经很强了,pH值在10以上的,我觉得不妥
6楼2009-07-29 23:11:29
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小薇6702

银虫 (小有名气)

那再我的这个条件下,用什么方法更好一些呢?
7楼2009-07-30 07:59:40
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2004371310

木虫 (著名写手)

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chiraler(金币+1,VIP+0):谢谢参与 8-1 08:23
用了缓冲盐的色谱柱冲洗时候关键是起始要用高比例的水冲洗,防止盐析出,可以试试梯度洗脱:
0 min   甲醇或乙腈:水 15:85
15 min 甲醇或乙腈:水 15:85
20 min 甲醇或乙腈:水 80:20
30 min 甲醇或乙腈:水 100:0
最后柱子保留在纯有机溶剂里(甲醇或乙腈)
8楼2009-07-30 09:54:58
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思行合一

氨基柱比较麻烦一下 ,你看一下这个材料

★ ★
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9楼2009-07-30 10:23:20
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小薇6702

银虫 (小有名气)

谢谢各位!学习了。
10楼2009-07-30 13:45:19
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