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求助!为何提取DNA梯度稀释后Ct值无差别已有1人参与
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| 各位小伙伴,本人提取放线菌DNA10倍梯度稀释准备做标准曲线,稀释5个梯度跑PCR发现各梯度间Ct值无明显变化,甚至出现稀释后Ct值比未稀释模板还小的情况。另外Ct数值非常小,大概是10左右,有的还达到6,7这样的数值。融解曲线是单峰,体系是20ul里加入2ul模板,正反引物各0.8ul,6.4ul dd水及10ul SYBR green。未稀释的DNA浓度为20ng/ul。稀释过程是10ul加入90ul TE缓冲液。请大家帮忙分析可能原因,不胜感激! |
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