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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » SDS-PAGE的MAKER条带只跑出五条，请教各位高手是哪些原因造成的
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gwwgww5566

金虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE的MAKER条带只跑出五条，请教各位高手是哪些原因造成的

SDS-PAGE电泳MAKER总是跑出四条或是五条带，低分子量蛋白标记是TakaRa的，标准条带应该是6条，分别是97.2、66.4、44.3、29.0、20.1、14.3(KDa)，实验期间调节过堆积胶、分离胶的pH，分离胶的浓度也做过变化，但是MAKER条带还是跑不全，好像是缺少第一条（97.2那条），请各位大虫分析一下。

[ Last edited by gwwgww5566 on 2009-7-28 at 21:53 ]
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自信&真诚
1楼 2009-07-28 17:45:43
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yanlili

金虫 (正式写手)
★
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缺少第一条比较少见啊，是不是marker有问题啊 降解了 或缺了
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2楼2009-07-28 18:56:50
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chuan2388

金虫 (小有名气)
★
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浓缩胶和分离胶的浓度不要随便去改变。
有没有考虑过电压的影响？估计是电压太高的缘故，导致大分子量蛋白来不及跑开。
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把时间都浪费在自己身上吧！
3楼2009-07-28 18:56:53
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yanlili

金虫 (正式写手)
最小的还是最大的，没说清楚啊 最小的一条没有可能是你胶的浓度不够大 电泳结束时跑出来了
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4楼2009-07-28 18:57:43
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chuan2388

金虫 (小有名气)
所说的第一条是指哪条啊？大片段吗？
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把时间都浪费在自己身上吧！
5楼2009-07-28 18:58:40
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mourning

木虫 (正式写手)
★
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原因很多，要建立稳定的体系啊
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6楼2009-07-28 20:45:46
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
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我也出现过这样的问题，分子量大的那条带没有，或者很淡。
我认为原因是：maker垂直放置（我就是这样的），分子量大的蛋白质沉到底部，取maker又是从上面取的，所以出现这种情况，点maker时将maker混匀。
另外，有些maker使用前，95 ℃煮沸5 min，也可以改善这种情况。
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Thank-you，so-blue.
7楼2009-07-29 10:54:44
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
最可能的原因就是：

你的Marker 降解了！
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-08-04 09:43:21
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tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
也有可能没有分开，97.2和66.4重叠在一起了
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9楼2009-08-04 10:27:32
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baiyidao

金虫 (小有名气)
★
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这可能是marker分解和上样之前没有充分混匀marker，
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10楼2009-08-04 16:05:26
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