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gwwgww5566

金虫 (正式写手)

[交流] SDS-PAGE的MAKER条带只跑出五条,请教各位高手是哪些原因造成的

SDS-PAGE电泳MAKER总是跑出四条或是五条带,低分子量蛋白标记是TakaRa的,标准条带应该是6条,分别是97.2、66.4、44.3、29.0、20.1、14.3(KDa),实验期间调节过堆积胶、分离胶的pH,分离胶的浓度也做过变化,但是MAKER条带还是跑不全,好像是缺少第一条(97.2那条),请各位大虫分析一下。

[ Last edited by gwwgww5566 on 2009-7-28 at 21:53 ]
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自信&真诚
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yanlili

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
缺少第一条比较少见啊,是不是marker有问题啊 降解了 或缺了
2楼2009-07-28 18:56:50
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chuan2388

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
浓缩胶和分离胶的浓度不要随便去改变。
有没有考虑过电压的影响?估计是电压太高的缘故,导致大分子量蛋白来不及跑开。
把时间都浪费在自己身上吧!
3楼2009-07-28 18:56:53
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yanlili

金虫 (正式写手)


最小的还是最大的,没说清楚啊 最小的一条没有可能是你胶的浓度不够大 电泳结束时跑出来了
4楼2009-07-28 18:57:43
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chuan2388

金虫 (小有名气)

所说的第一条是指哪条啊?大片段吗?
把时间都浪费在自己身上吧!
5楼2009-07-28 18:58:40
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mourning

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
原因很多,要建立稳定的体系啊
6楼2009-07-28 20:45:46
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也出现过这样的问题,分子量大的那条带没有,或者很淡。
我认为原因是:maker垂直放置(我就是这样的),分子量大的蛋白质沉到底部,取maker又是从上面取的,所以出现这种情况,点maker时将maker混匀。
另外,有些maker使用前,95 ℃煮沸5 min,也可以改善这种情况。
Thank-you,so-blue.
7楼2009-07-29 10:54:44
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

最可能的原因就是:

你的Marker 降解了!
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2009-08-04 09:43:21
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tiani_tan

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也有可能没有分开,97.2和66.4重叠在一起了
9楼2009-08-04 10:27:32
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baiyidao

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这可能是marker分解和上样之前没有充分混匀marker,
10楼2009-08-04 16:05:26
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