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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pfu 的pcr问题
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smallcat227

木虫 (著名写手)
★
381466632(金币+1):谢谢参与
楼主用普通的Taq扩增效果如何？

同意楼上几位说的，延长延伸时间，退火时间差不多够了

不过最根本的问题还是引物设计，有条件的话最好还是重新设计
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11楼2009-07-28 15:33:50
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695

木虫 (职业作家)
★
381466632(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by fz-xyz at 2009-7-28 08:45:
两条带的话可以用oligo看看到底是哪里的错配，之后修改Tm值。
或者直接尝试不同Tm值。
退火时间应该是根据目的条带长短确定的啊~

您要是能帮助教会俺这一招多好啊
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12楼2009-07-28 16:43:59
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xiangao

金虫 (正式写手)
★
381466632(金币+1):谢谢参与
PCR遇到了同样的问题
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13楼2009-07-28 18:21:58
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joulia

银虫 (正式写手)
★
381466632(金币+1):谢谢参与
两条带的话可以用oligo看看到底是哪里的错配，之后修改Tm值。
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14楼2009-07-28 18:22:23
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lizhou691

金虫 (著名写手)
★
381466632(金币+1):谢谢参与
路过，顶一下
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15楼2009-07-28 18:22:42
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wenj2377

木虫 (著名写手)
支持一下
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16楼2009-07-28 18:22:49
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枫儿1398

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不太清楚，支持一下 ！
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never give up!
17楼2009-07-28 18:22:59
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
2KB的话可试试延伸2min，退火温度再试着调整一下，提高温度可提高反应的特异性
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18楼2009-07-28 20:45:56
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381466632

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by witch-dj at 2009-7-28 08:09:
延伸时间增长为3min，退火温度在调节一下，根据引物的Tm值，试试看

试了，没有条带
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19楼2009-07-29 13:13:48
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381466632

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-7-28 20:45:
2KB的话可试试延伸2min，退火温度再试着调整一下，提高温度可提高反应的特异性

谢谢，正在试
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20楼2009-07-29 13:15:24
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