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smallcat227

木虫 (著名写手)


381466632(金币+1):谢谢参与
楼主用普通的Taq扩增效果如何?

同意楼上几位说的,延长延伸时间,退火时间差不多够了

不过最根本的问题还是引物设计,有条件的话最好还是重新设计
11楼2009-07-28 15:33:50
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695

木虫 (职业作家)


381466632(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by fz-xyz at 2009-7-28 08:45:
两条带的话可以用oligo看看到底是哪里的错配,之后修改Tm值。
或者直接尝试不同Tm值。
退火时间应该是根据目的条带长短确定的啊~

您要是能帮助教会俺这一招多好啊
12楼2009-07-28 16:43:59
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xiangao

金虫 (正式写手)


381466632(金币+1):谢谢参与
PCR遇到了同样的问题
13楼2009-07-28 18:21:58
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joulia

银虫 (正式写手)


381466632(金币+1):谢谢参与
两条带的话可以用oligo看看到底是哪里的错配,之后修改Tm值。
14楼2009-07-28 18:22:23
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lizhou691

金虫 (著名写手)


381466632(金币+1):谢谢参与
路过,顶一下
15楼2009-07-28 18:22:42
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wenj2377

木虫 (著名写手)

支持一下
16楼2009-07-28 18:22:49
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枫儿1398

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不太清楚,支持一下 !
never give up!
17楼2009-07-28 18:22:59
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小猫三两只

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
2KB的话可试试延伸2min,退火温度再试着调整一下,提高温度可提高反应的特异性
18楼2009-07-28 20:45:56
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381466632

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by witch-dj at 2009-7-28 08:09:
延伸时间增长为3min,退火温度在调节一下,根据引物的Tm值,试试看

试了,没有条带
19楼2009-07-29 13:13:48
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381466632

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-7-28 20:45:
2KB的话可试试延伸2min,退火温度再试着调整一下,提高温度可提高反应的特异性

谢谢,正在试
20楼2009-07-29 13:15:24
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